二氧化碳培養(yǎng)箱消毒及消毒劑配制方法
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二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)如何進(jìn)行消毒呢?根據(jù)上海巴玖工程師的經(jīng)驗(yàn),為您總結(jié)了以下二氧化碳培養(yǎng)箱的消毒方法,希望能對(duì)您有幫助。
如果是隔水式二氧化碳培養(yǎng)箱可采用甲酸熏蒸(甲醛與高錳酸鉀反應(yīng)生成甲酸),然后再用75%酒精擦培養(yǎng)箱內(nèi)壁即可,效果較好。
如果是氣套式二氧化碳培養(yǎng)箱可用75%酒精直接擦培養(yǎng)箱內(nèi)壁即可,或采用隔水式熏蒸,但熏蒸前要先將二氧化碳和溫度探頭封閉好,防止甲酸腐蝕。
實(shí)驗(yàn)前,無菌室及無菌操作臺(tái)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70% 酒精擦拭無菌操作臺(tái)面,并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才可開始實(shí)驗(yàn)操作。
每次操作只處理一株細(xì)胞,以免造成細(xì)胞交叉污染。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)。如需要繼續(xù)進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn),則用70% 酒精擦拭無菌操作臺(tái)面,再讓無菌操作臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才可進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)操作。
無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔與寬敞,必要物品,如試管架,移液器或吸管頭等可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完后應(yīng)及時(shí)移出,以利氣體流通。
實(shí)驗(yàn)用品要用70%酒精擦拭后才能帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在操作臺(tái)中央無菌區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,勿在邊緣非無菌區(qū)域操作。小心取出無菌實(shí)驗(yàn)用品,避免造成污染。切勿碰觸吸管與吸頭頭部或容器瓶口,不要在打開的容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。
容器打開后,用手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放在臺(tái)面上。工作人員應(yīng)注意自身的安全,必須穿戴實(shí)驗(yàn)衣與手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來自人源性或病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心,并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)的無菌操作臺(tái)(至少兩級(jí))。
二氧化碳培養(yǎng)箱常用消毒劑及配制方法:
1、漂白粉水:取漂白粉10克,加水140毫升配成。通常在使用前臨時(shí)配制,靜置1~2小時(shí),取上清液噴射,進(jìn)行室內(nèi)消毒,每平方米用1升。
2、藥皂:煤酚皂、硼酸皂等各種藥皂的水溶液,均可用于器具、橡皮塞及手指的消毒。
3、35%甲醛水溶液(HCHO):又名福爾馬林,使蛋白質(zhì)變性。用于培養(yǎng)室、無菌室的滅菌。
4、0.1%的升汞水(HgCL3):能使蛋白質(zhì)變性,抑制酶類。0.1%升汞配制方法是稱取升汞0.1克,用少許酒精溶解,再加水至100毫升即成。用于無菌箱、培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿四周表面以及手指的滅菌。
5、石炭酸(C6H5OH),5%濃度噴霧后,能使蛋白變性沉淀。石炭酸(苯酚)50毫升,加水950毫升配成。用于 工作服、實(shí)驗(yàn)桌的滅菌。殺菌效果同升汞
6、高錳酸鉀(KMnO4):氧化劑。0.1%濃度能使蛋白質(zhì)與氨基酸氧化,失去酶的活性,用于消毒,能抑制或殺死 雜菌。
7、乙醇(CH3CH3OH):又稱酒精。消毒以75%濃度的效果理想地。它能使蛋白質(zhì)脫水變性。高濃度酒精會(huì)使蛋白質(zhì)很快脫水凝固,消毒作用反而減弱。
8、新潔爾滅:0.25%新潔爾滅用于無菌箱、無菌室的滅菌。一般新潔爾滅5%原液50毫升;加水950毫升配成。
9、2%硫酸銅溶液:用硫酸銅(膽礬)2克,加水至 100毫升加熱溶解配成。用于床架、木架等各種菌種架的消 毒。還可用5%硫酸銅溶液。
10、0.5%波爾多液:先用硫酸銅1斤,溶于100斤水, 再用石灰1斤,加水100斤。然后等量混合起來即成。用于菌種架、段木的消毒。
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