美國加州大學(xué)開發(fā)了SunTag技術(shù)
[內(nèi)容提要]:記者獲悉到由美國加州大學(xué)Ronald Vale實驗室的博士后Marvin Tanenbaum開發(fā)了一項SunTag新技術(shù)。他在目的蛋白中加入多個拷貝（多達(dá)24個）的多肽表位，將這個蛋白與能識別該表位的熒光抗體共表達(dá)。
近日，記者獲悉到由美國加州大學(xué)Ronald Vale實驗室的博士后Marvin Tanenbaum開發(fā)了一項SunTag新技術(shù)。他在目的蛋白中加入多個拷貝（多達(dá)24個）的多肽表位，將這個蛋白與能識別該表位的熒光抗體共表達(dá)。
一般情況下，成像細(xì)胞中的單個RNA或DNA分子是在目標(biāo)分子中插入多個拷貝的特定序列，讓熒光標(biāo)記的蛋白能夠結(jié)合上來。這個序列的拷貝數(shù)越多，目標(biāo)分子結(jié)合的熒光蛋白就越多，信號也就越明亮。“何不對蛋白做這種處理呢？”加州大學(xué)Ronald Vale實驗室的博士后Marvin Tanenbaum開始著手解決這個問題。
此前成像細(xì)胞內(nèi)蛋白的主要方式是，在其序列中填入一個發(fā)熒光的結(jié)構(gòu)域（比如綠色熒光蛋白GFP）。在一般熒光顯微鏡下，帶GFP結(jié)構(gòu)域的單個蛋白是很暗淡的，但添加太多GFP結(jié)構(gòu)域又會讓蛋白變得過大。
Tanenbaum為此開發(fā)了SunTag技術(shù)。他在目的蛋白中加入多個拷貝（多達(dá)24個）的多肽表位，然后將這個蛋白與能識別該表位的熒光抗體共表達(dá)。這一技術(shù)發(fā)表在近期的Cell雜志上。
“這個技術(shù)主要在于它比較簡單，”Albert Einstein醫(yī)學(xué)院的Robert Singer說。Tanenbaum和同事對這一系統(tǒng)進(jìn)行了大量的優(yōu)化工作，這樣的努力是值得的。
SunTag在目標(biāo)蛋白上添加多個微小的多肽表位（橙色），允許人們給一個蛋白添加多個標(biāo)簽。這些表位可以招募連有熒光標(biāo)記的單鏈抗體scFv。
SunTag可以用來增強轉(zhuǎn)錄。研究人員設(shè)計了一個定位到某基因啟動子區(qū)域的dCas9，在上面連接了一串多肽表位，讓它攜帶多拷貝的轉(zhuǎn)錄激活子VP64，有此增加了這個基因的轉(zhuǎn)錄。
