電泳儀主要用途及原理細說
電泳儀具體有什么用途呢?它的原理是怎樣的?以及電泳儀有哪些分類?下面將為您細說:
一、電泳儀應(yīng)用及用途
1、電泳儀被廣泛用于分子生物學、遺傳學和生物化學等領(lǐng)域,主要可分離核酸和蛋白質(zhì),也可以純化(將我們需要的條帶割下來,進一步處理得到我們需要的核酸或蛋白)。
2、電泳:依據(jù)分子或顆粒所帶的電荷、形狀和大小等不同,因而在電場介質(zhì)中移動的速度不同,從而達到分離的技術(shù)。
二、電泳儀原理
帶電粒子在直流電場作用下于一定介質(zhì)中所發(fā)生的定向運動,利用這一現(xiàn)象對化學或生物化學組分進行分離分析的技術(shù)稱之為電泳。生物學上的重要物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核酸、同工酶等,在溶液中能吸收或給出氫離子從而帶電。因此,它們在電場影響下,在不同介質(zhì)中的運動速度是不同的。這樣用電泳的方法便可對其進行定量分析,或者將一定混合物分離成各個組分以及作少量制備。
三、電泳儀的分類
1、常規(guī)電泳儀:其組成部件為可調(diào)穩(wěn)壓穩(wěn)流電源,垂直電泳槽,水平電泳槽,電極連接線,支持體(非凝膠性支持體區(qū)帶電泳(支持體有: ①淀粉②纖維素粉 ③玻璃粉,硅膠等);凝膠支持體區(qū)帶電泳支持體有: ①淀粉液②聚丙烯酰胺凝膠 ③瓊脂(糖)凝膠 );陶瓷板,抽水泵,輸水管,冰水曹等部件組成。
2、毛細管電泳儀:其主要部件有0~30kV可調(diào)穩(wěn)壓穩(wěn)流電源,內(nèi)徑小于100μm(常用50~75μm)、長度一般為30~100cm的彈性石英毛細管、電極槽、檢測器和進樣裝置。檢測器有紫外/可見分光檢測器、激光誘導熒光檢測器和電化學檢測器,前者[much]為常用。進樣方法有電動法(電遷移)、壓力法(正壓力、負壓力)和虹吸法。成套儀器還配有自動沖洗、自動進樣、溫度控制、數(shù)據(jù)采集和處理等部件。
3、其他電泳儀:Tiselius或微量電泳、顯微電泳、等電點聚焦電泳技術(shù)、等速電泳技術(shù)、密度梯度電泳等。是一種非支持體的電泳儀也稱為自由電泳法的發(fā)展并不迅速,因為其電泳儀構(gòu)造復(fù)雜、體積龐大,操作要求嚴格。
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