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普通PCR儀與熒光定量PCR儀的差異

[內(nèi)容提要]:PCR儀根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)可以將PCR儀分為普通PCR儀和實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀等,普通PCR儀與熒光定量PCR儀存在哪些差異,我們又該如何區(qū)分?上海巴玖請(qǐng)到了劉師傅講述普通PCR儀與熒光定量PCR儀差異,請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀!

普通PCR儀與熒光定量PCR儀的差異

PCR根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀四類,這四類PCR儀存在哪些差異,我們又該如何區(qū)分?今天上海巴玖請(qǐng)到了劉師傅講述普通PCR儀與熒光定量PCR儀的差異,請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀!

美國(guó)ABI ProFlex™ PCR儀

   普通的PCR比熒光定量PCR儀少了熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),普通的PCR儀是做定性分析和擴(kuò)增基因片段,而實(shí)時(shí)熒光定量PCR主要是用來(lái)定量分析和確定基因轉(zhuǎn)錄水平的,定量PCR儀可以做普通PCR儀的工作,反之就可以了,況且這樣代價(jià)太大了,一般的實(shí)驗(yàn)室都不允許這樣做的??傊畠烧叩墓δ懿荒芑ハ嗳〈穸葌鞲衅魈筋^,不銹鋼電熱管PT100傳感器,鑄鋁加熱器,加熱圈流體電磁. 
  
普通的基因擴(kuò)增儀(PCR)只能夠定性地分析是否存在目標(biāo)片段。但是價(jià)格要低很多,而且運(yùn)行成本也要低很多。不過(guò)不能直接得到擴(kuò)增結(jié)果,還需要做電泳檢測(cè)。實(shí)際中檢測(cè)遺傳疾病,品種分子標(biāo)記篩選,甚至親自鑒定等都可以由普通PCR儀完成。
  
但是,某些需要定量的實(shí)驗(yàn)就必須用到實(shí)時(shí)定量PCR了。比如檢測(cè)某些病原物的數(shù)量(血液乙肝病毒復(fù)制程度),特定基因的表達(dá)量(比如結(jié)合反轉(zhuǎn)錄做的RNA定量分析),某些基因在染色體組中拷貝數(shù)(以前往往使用southern blot技術(shù))等等。熒光定量PRC一般不需要對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析,操作相對(duì)簡(jiǎn)單些,但是耗材實(shí)在是貴。

美國(guó)ABI StepOne™實(shí)時(shí)定量PCR系統(tǒng)
  
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),看有沒有用普通PCR儀,看有多少用熒光定量PCR ?;驍U(kuò)增儀只能擴(kuò)增,不能檢測(cè),[cheapest。熒光定量PCR儀除了擴(kuò)增,還能在擴(kuò)增的同時(shí)檢測(cè)DNA發(fā)出的熒光信號(hào),試劑和儀器都更貴。

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